从人白细胞cDNA文库筛选凋亡素相互作用蛋白
来源于鸡贫血病毒的小分子蛋白-凋亡素(apoptin)能够选择性诱导肿瘤细胞凋亡,为研究其选择性诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制,利用酵母双杂交系统筛选从人白细胞cDNA文库筛选apoptin相互作用蛋白,核酸序列分析及同源性检索表明,其中一个与ABP280(actin-binding protein 280)有高度同源性.细胞免疫共沉淀实验结果显示:在哺乳动物细胞水平仍能够检测到apoptin与ABP280片段的特异的相互作用.分别构建缺失C端11个氨基酸、中间33~46位氨基酸和二者均缺失的apoptin的3个突变体,突变体与ABP280相互作用研究表明:apoptin的33~46位氨基酸(核外运信号)对于apoptin与ABP280的相互作用是必需的,而C端核定位信号/DNA结合序列对于apoptin与ABP280的相互作用不是充分必要的.
作 者: 孙国敬 童新 孟祥兵 董燕 孙志贤 作者单位: 军事医学科学院放射医学研究所北京1000850 刊 名: 生物化学与生物物理进展 ISTIC SCI PKU 英文刊名: PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年,卷(期): 2001 28(5) 分类号: Q255 关键词: 凋亡素 酵母双杂交 ABP280 免疫共沉淀