Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及荧光共定位研究

Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及荧光共定位研究

目的:观察脑信号蛋白Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及两者的荧光共定位情况,为明确Sema4C和GIPC在亚细胞水平的相互作用提供佐证.方法:将Sema4C的基因编码区全长、胞外段和胞内段分别构建到pEGFPN1和pEGFPC1表达载体中,将GIPC编码区基因构建到pDsRed-C1表达载体中,分别转染HEK293细胞,观察亚细胞定位;将pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC分别共转染HEK293和COS7细胞,观察两者的荧光共定位情况.结果:酶切鉴定及测序结果表明重组载体构建正确,Sema4C蛋白全长和胞外段呈跨膜分布,而胞内段在全细胞中呈弥散样分布;GIPC在胞浆内呈斑块状聚集分布;pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC存在荧光共定位区域.结论:Sema4C主要在胞膜和胞浆内表达.GIPC主要在胞浆内呈斑块样聚集分布;Sema4C和GIPC之间存在荧光共定位.

作 者： 吴燕 吴海涛 刘淑红 范文红 范明 WU Yan WU Hai-Tao LIU Shu-Hong FAN Wen-Hong FAN Ming   作者单位： 军事医学科学院,基础医学研究所,北京,100850  刊 名： 生物技术通讯  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 19(3)  分类号： Q25  关键词： Sema4C   脑信号蛋白   GIPC   HEK293细胞   COS7细胞   激光共聚焦显微镜