葡激酶突变体Y1-Sak的体外变复性研究

葡激酶突变体Y1-Sak的体外变复性研究

具有低免疫原性的双功能葡激酶突变体Y1-Sak(△15,S16K,K74A,E75A,R77A,K109R,F111D)在大肠杆菌中的表达产物为包涵体,必须进行体外变复性才能得到活性.详细研究了复性方式、pH、温度、复性的初始蛋白浓度和添加L-精氨酸对Y1-Sak的体外变复性的影响,发现复性温度和添加的L-精氨酸对Y1-Sak的复性有重要的影响.经过工艺优化后,Y1-Sak的纯化活性回收率达到40%左右,蛋白比活性由20 kU/mg提高到53 kU/mg.用动态光散射分析发现,工艺优化后复性的高比活性Y1-Sak的水合动力学半径与野生型葡激酶相近,分子基本处于单体状态.

作 者： 贺进田 王改珍 宋后燕 HE Jin-tian WANG Gai-zhen SONG Hou-yan   作者单位： 贺进田,HE Jin-tian(河北师范大学,生命科学学院,河北,石家庄,050016;复旦大学,教育部分子医学重点实验室,上海,200032)

王改珍,WANG Gai-zhen(河北科技大学,环境科学与工程学院,河北,石家庄,050018)

宋后燕,SONG Hou-yan(复旦大学,教育部分子医学重点实验室,上海,200032) 

刊 名： 河北师范大学学报（自然科学版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF HEBEI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 30(4)  分类号： Q510  关键词： 葡激酶突变体   复性   包涵体  

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