Aeropyrum pernix K1磷脂酶A2的克隆、表达及其性质

Aeropyrum pernix K1磷脂酶A2的克隆、表达及其性质

从超嗜热需氧古细菌Aeropyrum pernix K1中抽提出染色体基因组,经PCR扩增得到磷脂酶A2基因,用带有His-tag标记的pET15b作为表达载体,在大肠杆菌BLP中成功地诱导表达.表达产物经过Ni-螯合柱一步得到纯化.SDS-PAGE检测只有一条带,其准确分子量为17,871kD.对纯化后的磷脂酶A2测定其酶活性和生物活性,得出其最适反应温度为90℃,最适pH范围为7.8～8.2.至此首次成功地在大肠杆菌中表达了古细菌嗜热磷脂酶A2,这将为以后对该酶的结构和功能以及耐热机制研究打下很好的基础,同时有利于古细菌研究领域的扩展.

作 者： 卢冬梅 吴英松 解桂秋 高仁钧 王智 曹淑桂 冯雁   作者单位： 卢冬梅,吴英松(广州市达瑞抗体工程技术有限公司,广州,510665)

解桂秋,高仁钧,王智,曹淑桂,冯雁(吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室,长春,130023) 

刊 名： 微生物学通报  ISTIC PKU 英文刊名： MICROBIOLOGY  年，卷(期)： 2006 33(5)  分类号： Q78  关键词： Aeropyrum pernix K1   磷脂酶A2   古细菌   热稳定性  

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