重组葡激酶工程菌的构建方法

重组葡激酶工程菌的构建方法

目的:利用N端缺失10个氨基酸的葡激酶(recombinant staphylokinase,rSaK)重组质粒,构建了表达可溶性rSaK126蛋白的工程菌,并研究不同条件下工程菌诱导表达目的蛋白含量的差异及纯化途径.方法:采用细菌活化和培养方法诱导目的蛋白,并用SDS-PAGE测其含量,应用层析技术纯化蛋白.结果:成功构建表达重组葡激酶的工程菌,表达的重组葡激酶蛋白约占菌体总蛋白的50%,经纯化后回收率为60%,纯度达99%以上.结论:成功构建高效表达重组葡激酶的工程菌,并获得了高含量、高纯度的目的蛋白.

作 者： 孙丽光 荣爱红 赵勇 王磊 刘娅 SUN Li-guang RONG Ai-hong ZHAO Yong WANG Lei LIU Ya   作者单位： 孙丽光,刘娅,SUN Li-guang,LIU Ya(吉林大学公共卫生学院,长春,130021)

荣爱红,RONG Ai-hong(吉林省人民医院检验科,长春,130021)

赵勇,王磊,ZHAO Yong,WANG Lei(中国科学院动物研究所,北京,100080) 

刊 名： 中国生物工程杂志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(5)  分类号： Q81  关键词： 重组葡激酶   诱导表达   蛋白纯化  

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