人工合成草鱼生长激素cDNA在大肠杆菌中的表达
经密码子优化的人工合成草鱼生长激素cDNA与表达载体pET-28a(+)重组,构建重组表达质粒pET-GH。转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性克隆,IPTG诱导表达。12.5%的SDS-PAGE分析显示,大肠杆菌表达产物中含有与草鱼生长激素分子量一致的新增蛋白带,激光密度扫描,其产量约占菌体总蛋白的40%。金属离子螯合层析柱亲和纯化,获得电泳纯的重组蛋白。Western-blotting和酶联免疫吸附受体法检测证实:重组蛋白与抗草鱼生长激素的多克隆抗体发生特异性结合;复性后的重组蛋白有与天然草鱼生长激素一致的生物学活性。
作 者: 王伟 汪亚平 朱作言 WANG Wei WANG Ya-Ping ZHU Zuo-Yan 作者单位: 中国科学院水生生物研究所, 刊 名: 遗传学报 ISTIC SCI PKU 英文刊名: ACTA CENETICA SINICA 年,卷(期): 2001 28(4) 分类号: Q95 关键词: 草鱼生长激素 原核表达 纯化 酶联免疫吸附受体检测