PCR-RFLP中Chelex-100制备DNA模板的方法建立及其条件优化
目的:建立一种快速、可靠、经济的DNA纯化技术用于分子流行病学调查及群体遗传学的研究.方法:根据MMP3基因外显子2中rs679620的SNP区域(-Lys45Glu-)设计引物,采用Chelex-100法从微量全血中提取人基因组DNA,利用PCR-RFLP对其进行检测,观察基因分型结果.结果表明:取10μL全血,加入200μL 5%Chehx-100溶液,56℃水浴保温30 min后,100℃水浴8 min,离心取上清为最佳用于PCR的DNA模板提取条件.经PCR扩增及酶切验证,其DNA条带特异、清晰,适用于基因分型.结论:提取人基因组DNA的Chelex-100法所需血样微量、操作简单,快速、可靠、经济,特别适合于大量样本的DNA提取,可用于人群分子流行病学调查及群体遗传学的研究.
作 者： 欧阳刚 胡文娟 姚品芳 王红 陈思礼 王朝元 李劲 Ouyang Gang Hu Wenjuan Yao Pinfang Wang Hong Chen Sili Wang Chaoyuan Li Jin 作者单位： 欧阳刚,胡文娟,陈思礼,李劲,Ouyang Gang,Hu Wenjuan,Chen Sili,Li Jin(中南民族大学,生命科学学院,武汉,430074)姚品芳,王朝元,Yao Pinfang,Wang Chaoyuan(湖北省肿瘤医院,肿瘤研究所,武汉,430079)
王红,Wang Hong(中南民族大学,校医院,武汉,430074)
刊 名： 中南民族大学学报（自然科学版） 英文刊名： JOURNAL OF SOUTH-CENTRAL UNIVERSITY FOR NATIONALITIES(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 2009 28(1) 分类号： Q783.1 关键词： Chelex-100 基因组DNA提取 基因分型